Bước đầu khảo sát quy trình bảo quản HG-CSF tái tổ hợp bằng phương pháp đông khô

Tóm tắt

hG-CSF là một cytokine có chức năng kích thích sự tăng sinh, biệt hóa, trưởng thành của bạch cầu hạt trung tính, thường được sử dụng như một loại thuốc điều trị chứng suy giảm bạch cầu ở những bệnh nhân ung thư hóa trị liệu cũng như ở bệnh nhân mắc các bệnh lý khác. Sau quá trình sản xuất, hG-CSF tái tổ hợp tổng hợp trong E. coli ở dạng lỏng, không được glycosyl hóa nên protein không ổn định, dễ mất hoạt tính, thời gian bảo quản ngắn. Trong nghiên cứu này, chúng tôi trình bày kết quả bước đầu khảo sát việc bảo quản hG-CSF tái tổ hợp bằng phương pháp đông khô. Quy trình đông khô đã được đề xuất với các thông số cơ bản như điều kiện làm lạnh là -40^oC trong 60 phút, thể tích mẫu là 1/10 thể tích vật chứa, nhiệt độ ngưng tụ -70^oC, áp suất 20mTorr, 24 giờ. Mẫu sau quá trình đông khô có dạng bột, khô, mịn, màu trắng. Hiệu quả bảo quản của phương pháp đông khô được kiểm tra qua kết quả phân tích cấu hình hG-CSF bằng điện di Native-PAGE và sắc ký RP-HPLC; thử nghiệm hoạt tính sinh học in vitro trên tế bào M-NFS-60 và thử nghiệm hoạt tính in vivo trên chuột nhắt trắng Mus musculus.