Nhân dòng và biểu hiện protein dung hợp Glutathion transferase-streptavidin trên bào tử Bacillus subtilis và đánh giá khả năng gắn đặc hiệu với kháng thể cetucimab biotinyl hóa

Tóm tắt

Chúng tôi đã nhân dòng gen dung hợp (cotB-gst-strepiavidin) mã hóa cho ba protein nối tiếp nhau bao gồm protein lớp vỏ áo cùa bào tử CotB, Glutaihion s Transferase (GST), vả streptavidin vào nhiễm sắc thể cùa Bacillus subtilis PY79 để tạo nên chủng lai tổ hợp SA2. Biểu hiện của streptavidin trên lớp vỏ của bào từ SA2 spores được kiếm chửng bởi phương pháp miễn dịch huỳnh quang, sử dụng kháng thể sơ cấp IgG thể kháng streptavidin và kháng thể thứ cấp kháng thỏ gắn chât huỳnh quang Alexa546. Gắn bám đặc hiệu của biotinylated cetuximab lên bào tử của Bacillus subtilis SAI (biểu hiện cotB-streptavidin) và lên Bacillus subtilis SA2 được phát hiện bởi phương pháp thẩm tách miễn dịch. Kết quả chi ra khả năng gắn của biotinylated cetuxiraab lên bào từ SA2 tăng lên không nhiều, khoảng 1,4 lần so với gắn lên bào tử SAI, gợi ý vai trò khiêm tốn cùa GST trong việc tăng cường sự bộc lộ của strcptavidin trên bề mặt bào tử để tương tác với biotuiylated cetuxJmab.